百奥迈科生物技术有限公司

https://biomics.biomart.cn

公众号

扫一扫
进入手机商铺

商家诚信度:
成立时间:2006年
入驻丁香通年限:9年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:52%
公司新闻

Genome Biol最新CRISPR综述文章

发布时间:2015-12-03 11:16 |  点击次数:

 

以CRISPR为基础的方法,已经迅速成为一种倍受青睐的方法,来干扰基因以发现它们的功能。来自哈佛-麻省理工学院布罗德研究所和麻省综合医院的研究人员Daniel B. Graham、David E. Root,在十一月二十七日的国际著名学术期刊《Genome Biology》上,发表题为“Resources for the design of CRISPR gene editing experiments”的综述文章,该综述文章回顾了基因编辑实验设计中的关键注意事项,并调查了目前可用来协助这一技术使用者的工具和资源。
 
细菌II型CRISPR-Cas9系统在哺乳动物和其他类型细胞中的适应性,大大提高了我们编辑基因组的能力。这项强大的技术已迅速成为探究基因功能一种备受青睐的方法。随着CRISPRs技术的发展和应用,对于有志于“使CRISPR技术跟上所有最新研究领域的发展以及帮助设计和执行CRISPR实验的可用工具和资源”的研究人员来说,还是具有挑战性的。为了CRISPR技术在哺乳动物细胞中的常见应用,这篇综述文章列出了设计CRISPR实验的一些实际问题,以及协助这类实验设计和执行的可用工具和资源。
 
CRISPR技术的主要应用包括,一小部分个体基因的功能性敲除(KO)、大规模的筛选、基因编辑(敲入)、转录激活或抑制(小规模或筛选规模)以及体内小鼠模型。在这项综述文章中,作者重点回顾了编辑编码基因以解开其功能的策略。在不同的应用程序之间,许多实验考虑是可以共享的,但是一些因素在它们的相关性或相对重要性方面有所不同。常见的问题包括,CRISPR相关蛋白9(Cas9)及其引导RNAs(gRNA)到靶细胞的传递,最大限度地提高打靶的活性和特异性,以及对编辑结果(疗效、特异性)的评估。作者讨论了CRISPR技术的基本知识,然后概括了基本的实验设计要素以及相关的工具和资源,并强调了特定CRISPR应用的相关问题。
 
文章最后,作者提出了CRISPR-Cas9的未来展望,文章指出,一个主要的目标是实现更有效、更可预测的基因编辑。如果可能将细胞群中的每个细胞转换成理想的基因型,那么选择和描述单个细胞系的辛苦工作将大大减少或消除。这将使我们可能设计大量的克隆细胞系,甚至在筛选规模上设计特定的等位基因。也将使我们更好地制备具有多重编辑的细胞。
 
考虑到基因干扰技术的最近发展,包括CRISPR基因编辑的前辈(如锌指核酸酶和转录激活因子样蛋白质),将CRISPR与其他基因编辑技术汇合,当然是有可能的。此时,CRISPR-Cas9享有各种优势,适用于不同的研究领域,便于使用、高效性、特异性和通用性。继续努力全面地探讨CRISPR技术在不同细胞类型和模型系统中的长处和局限性,将是至关重要的,在未来的几年当中,对新变异的研究和这项技术的应用,将会开辟新的功能基因组学机会。

信息来源:生物通